CULTURE IN-VITRO
SEMIS DE GRAINES
- Désinfection des graines dans une solution d'hypochlorite de
calcium à 20 grammes par litre pendant une demi-heure puis rincer les
graines à l'eau stérile. L'hypochlorite de calcium est le plus souvent
utilisé car il ne pénètre pratiquement pas dans les tissus.
- Les graines sont prélevées avec une spatule stérile (passée à la
flamme) et semées dans les bocaux contenant le milieu de croissance
(1)
Cette opération nécessite une propreté parfaite:
- Passage des mains à l'alcool à 70 degrés
- Port d'une blouse
- Travail dans une atmosphère "calme", la hotte stérile n'est pas
indispensable.
- Toujours travailler prés d'une flamme (moins de 20 cm)
- Après une période de 1 à 2 mois suivant les espèces, les jeunes
plants sont repiqués sur un deuxième milieu dit de développement.(2)
- Après 1 à 2 mois dans ce dernier milieu, les plantes sont sorties
des flacons, les racines bien nettoyées à l'eau claire pour enlever la
gélose. Les jeunes plantes sont alors repiquées en pot dans un
mélange: sable, tourbe. Il est nécessaire de garantir une température
constante. Ce dernier stade est souvent le plus difficile et les pertes
sont parfois importantes.
BOUTURAGE :
Le bouturage s'effectue par prélèvement (bouture sortant de la
culture in-vitro), à l'aide d'un scalpel, d'un fragment de feuille
(5mm2), et repiquage sur le milieu (1). Après développement d'une
plantule, on effectue une transplantation sur le milieu de croissance
(2), puis après deux mois on repique ces plantes en serre comme au
point 4 de cet article.
MILIEU DE SEMIS (1)
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MILIEU DE CROISSANCE (2)
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Pour 1 litre d'eau
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Pour un litre d'eau
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nitrate de calcium
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1g
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phosphate monopotassique
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0,25g
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sulfate de magnésium
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0,25g
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sulfate d'ammonium
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0,5g
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sulfate de fer
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0,025g
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sulfate de manganèse
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0,025g
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sucre de canne
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2Og
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agar
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8g
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PH=5,2
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(Base de KNUDSON)
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sulfate d'ammonium
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0,06g
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nitrate d'ammonium
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0,07g
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nitrate de potassium
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0,4g
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phosphate monopotassique
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0,3g
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nitrate de magnésium
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0,11g
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sulfate de fer
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0,02g
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sucre
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2Og
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agar
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5g
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charbon
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0,3g
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PH=6,2
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(Base de THOMALE)
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Il est possible de se procurer un ouvrage sur la culture in-vitro.
LA CULTURE IN-VITRO et ses applications horticoles, édition LAVOISIER
11 rue Lavoisier, 75008 Paris.
Commentaire: Cet article fait par un étudiant n'appartenant pas à
l'association a le mérite de nous donner quelques explications sur la
culture in-vitro. Certains adhérents ont une bonne connaissance de ce
mode de culture, peut-être pourront-ils nous aider dans un futur
article afin de pouvoir multiplier certaines espèces dont nous ne
disposons que de quelques graines.
DIONÉE 15 - 1988
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